Ταυτοποίηση και διάκριση ομάδας ελληνικών ποικιλιών αμπέλου (Vitis Vinifera L.) με μοριακές μεθόδους

Abstract

Με την εργασία αυτή επιχειρήθηκε η διάκριση και ταυτοποίηση 14 ποικιλιών αμπέλου που καλλιεργούνται στην Ελλάδα με την χρησιμοποίηση μοριακής μεθόδου. Ο μεγάλος αριθμός των ποικιλιών του Vitis vinifera L., η γενετική ποικιλομορφία και η πολυκλωνικότητα που τις χαρακτηρίζει είναι οι βασικές αιτίες των προβλημάτων που παρουσιάζονται κατά τον προσδιορισμό και τη διάκριση των ποικιλιών αμπέλου με τις αμπελογραφικές μεθόδους. Όπως είναι γνωστό οι αμπελογραφικοί χαρακτήρες που χρησιμοποιούνται για την περιγραφή των ποικιλιών επηρεάζονται από τους περιβαλλοντικούς παράγοντες και την καλλιεργητική τεχνική. Τα προβλήματα εντείνονται και από την ακρίβεια της επιλογής του αντιπροσωπευτικού προς περιγραφή δείγματος, εξαιτίας τόσο των πολλών τύπων και παραλλαγών που αναφέρονται σε κάθε ποικιλία όσο και των πολλών συνωνύμων. Για την αντιμετώπιση των ειδικών προβλημάτων που παρουσιάζονται, ιδιαίτερα κατά την μελέτη συγγενών ποικιλιών, χρησιμοποιήθηκαν τα τελευταία χρόνια οι βιοχημικές και οι μοριακές μέθοδοι. Στην παρούσα εργασία χρησιμοποιήθηκε η μέθοδος RAPD. Ο πολυμορφισμός των εκκινητών που χρησιμοποιήθηκαν ήταν διάφορος καθώς και η αποτελεσματικότητά τους. Οι εκκινητές 1224, 1225, 1227 αποδείχθηκαν οι πιο αποτελεσματικοί στη διάκριση των ποικιλιών που μελετήθηκαν, όχι μόνο για την ποιότητα των ηλεκτροφορητικών ζωνών (ένταση και καθαρότητα) αλλά για τον αριθμό των ηλεκτροφορητικών φαινότυπων που σχημάτισαν. Ο πλέον χρήσιμος απ’ αυτούς είναι ο εκκινητής 1224.

This work attempts to identify and distinguish fourteen grape varieties grown in Greece by using the molecular method. The large number of varieties and clones of Vitis vinifera L., and their genetic diversity are the root causes of the problems that occur for identifying and distinguishing them by using ampelography traces. As it is known the ampelographic characters that are used for the description of the varieties are affected by environmental factors and the growing techniques. The problems are intensified by the accuracy of the selection of the representative sample, due to the description of many types and variations mentioned in each variety and the plethora of their synonyms. For addressing specific problems, biochemical and molecular methods are used, especially in the study of congenital varieties. In this work the RAPD method is used. Primers' polymorphisms, as well as their effectiveness, have produced several results. Primers 1224, 1225, 1227 have proved to be the most effective to distinguish the varieties studied, not only due to the quality of electrophoretic zones (intensity and purity ) but also because of the number of electrophoretic pattern formed. The most useful of these primers is 1224.