Κλωνοποίηση, έκφραση και χαρακτηρισμός των ισοενζύμων της μεταφοράσης του γλουταθείου από Erwinia carotovora

dc.contributor.advisor	Λάμπρου, Νικόλαος
dc.contributor.author	Γιαννόπουλος, Παναγιώτης
dc.date.accessioned	2015-10-05T11:24:58Z
dc.date.available	2015-10-05T11:24:58Z
dc.date.issued	2015-10-05
dc.date.submitted	2012
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/10329/6229
dc.description	Η Βιβλιοθήκη διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή	el
dc.description.abstract	Οι τρανσφεράσες της γλουταθειόνης (GST) μπορούν να μεταβολίσουν πλήθος υποστρωμάτων κύρια σε διαδικασίες αποτοξίνωσης αλλά και σε πλήθος μεταβολικών διαδικασιών, κάτι που τους δίνει προοπτικές να αξιοποιηθούν σε πολλές βιοτεχνολογικές εφαρμογές που άλλωστε πληθαίνουν τα τελευταία χρόνια. Το βακτήριο Erwinia carotovora subsp. Atroseptica SCRI1043 είναι πανταχού παρών φυπαθογόνο. Η επιτυχία του ως τέτοιο πιθανότατα οφείλεται σε ένζυμα που διαθέτει και το κάνουν ανθεκτικό στους μηχανισμούς άμυνας των φυτών, ανάμεσα στα οποία είναι και οι GSTs. Το βακτήριο αυτό εκφράζει τουλάχιστον έξι ισοτύπους GSTs, παρουσιάζοντας ενδιαφέρον από την άποψη αυτή. Στην παρούσα διπλωματική εργασία έγινε κατορθωτό να απομονωθούν τα έξι γονίδια που κωδικοποιούν αυτές τις GSTs από το γονιδίωμα του βακτηριακού αυτού στελέχους μέσω PCR. Ακολούθησε κλωνοποίηση των γονιδίων σε φορείς έκφρασης pCR ® T7/CT-TOPO ® και ετερόλογη έκφρασή του σε κύτταρα E. coli BL21 (DE3). Μετά απ’ αυτήν προσδιορίστηκε φωτομετρικά η καταλυτική τους ικανότητα απέναντι στο υπόστρωμα CDNB. Έτσι πραγματοποιήθηκε το πρώτο βήμα για τη μελέτη των ενζύμων αυτών και την ενδεχόμενη βιοτεχνολογική τους αξιοποίηση	el
dc.language.iso	el	el
dc.subject	Ισοένζυμα	el
dc.subject	Γλουταθείο	el
dc.title	Κλωνοποίηση, έκφραση και χαρακτηρισμός των ισοενζύμων της μεταφοράσης του γλουταθείου από Erwinia carotovora	el
dc.type	Μεταπτυχιακή εργασία	el
heal.type	masterThesis
heal.generalDescription	Η Βιβλιοθήκη διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή	el
heal.language	el
heal.access	free
heal.recordProvider	ΓΠΑ Τμήμα Γεωπονικής Βιοτεχνολογίας	el
heal.publicationDate	2012
heal.abstract	Οι τρανσφεράσες της γλουταθειόνης (GST) μπορούν να μεταβολίσουν πλήθος υποστρωμάτων κύρια σε διαδικασίες αποτοξίνωσης αλλά και σε πλήθος μεταβολικών διαδικασιών, κάτι που τους δίνει προοπτικές να αξιοποιηθούν σε πολλές βιοτεχνολογικές εφαρμογές που άλλωστε πληθαίνουν τα τελευταία χρόνια. Το βακτήριο Erwinia carotovora subsp. Atroseptica SCRI1043 είναι πανταχού παρών φυπαθογόνο. Η επιτυχία του ως τέτοιο πιθανότατα οφείλεται σε ένζυμα που διαθέτει και το κάνουν ανθεκτικό στους μηχανισμούς άμυνας των φυτών, ανάμεσα στα οποία είναι και οι GSTs. Το βακτήριο αυτό εκφράζει τουλάχιστον έξι ισοτύπους GSTs, παρουσιάζοντας ενδιαφέρον από την άποψη αυτή. Στην παρούσα διπλωματική εργασία έγινε κατορθωτό να απομονωθούν τα έξι γονίδια που κωδικοποιούν αυτές τις GSTs από το γονιδίωμα του βακτηριακού αυτού στελέχους μέσω PCR. Ακολούθησε κλωνοποίηση των γονιδίων σε φορείς έκφρασης pCR ® T7/CT-TOPO ® και ετερόλογη έκφρασή του σε κύτταρα E. coli BL21 (DE3). Μετά απ’ αυτήν προσδιορίστηκε φωτομετρικά η καταλυτική τους ικανότητα απέναντι στο υπόστρωμα CDNB. Έτσι πραγματοποιήθηκε το πρώτο βήμα για τη μελέτη των ενζύμων αυτών και την ενδεχόμενη βιοτεχνολογική τους αξιοποίηση	el
heal.abstract	Οι τρανσφεράσες της γλουταθειόνης (GST) μπορούν να μεταβολίσουν πλήθος υποστρωμάτων κύρια σε διαδικασίες αποτοξίνωσης αλλά και σε πλήθος μεταβολικών διαδικασιών, κάτι που τους δίνει προοπτικές να αξιοποιηθούν σε πολλές βιοτεχνολογικές εφαρμογές που άλλωστε πληθαίνουν τα τελευταία χρόνια. Το βακτήριο Erwinia carotovora subsp. Atroseptica SCRI1043 είναι πανταχού παρών φυπαθογόνο. Η επιτυχία του ως τέτοιο πιθανότατα οφείλεται σε ένζυμα που διαθέτει και το κάνουν ανθεκτικό στους μηχανισμούς άμυνας των φυτών, ανάμεσα στα οποία είναι και οι GSTs. Το βακτήριο αυτό εκφράζει τουλάχιστον έξι ισοτύπους GSTs, παρουσιάζοντας ενδιαφέρον από την άποψη αυτή. Στην παρούσα διπλωματική εργασία έγινε κατορθωτό να απομονωθούν τα έξι γονίδια που κωδικοποιούν αυτές τις GSTs από το γονιδίωμα του βακτηριακού αυτού στελέχους μέσω PCR. Ακολούθησε κλωνοποίηση των γονιδίων σε φορείς έκφρασης pCR ® T7/CT-TOPO ® και ετερόλογη έκφρασή του σε κύτταρα E. coli BL21 (DE3). Μετά απ’ αυτήν προσδιορίστηκε φωτομετρικά η καταλυτική τους ικανότητα απέναντι στο υπόστρωμα CDNB. Έτσι πραγματοποιήθηκε το πρώτο βήμα για τη μελέτη των ενζύμων αυτών και την ενδεχόμενη βιοτεχνολογική τους αξιοποίηση	en
heal.advisorName	Λάμπρου, Νικόλαος	el
heal.academicPublisher	ΓΠΑ Τμήμα Γεωπονικής Βιοτεχνολογίας	el
heal.academicPublisherID	aua
heal.fullTextAvailability	true
dc.contributor.department	ΓΠΑ Τμήμα Γεωπονικής Βιοτεχνολογίας	el
dc.description.degree	Βιοτεχνολογία και εφαρμογές στη γεωπονία	el