HEAL DSpace

Βιοχημική και μοριακή ανάλυση της βακτηριοφερριτίνης του Azotobacter vinelandii

Αποθετήριο DSpace/Manakin

Εμφάνιση απλής εγγραφής

dc.contributor.advisor Κατινάκης, Παναγιώτης
dc.contributor.author Γιαννόπουλος, Κωνσταντίνος
dc.date.accessioned 2015-09-22T07:35:23Z
dc.date.available 2015-09-22T07:35:23Z
dc.date.issued 2015-09-22
dc.date.submitted 2014
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10329/6056
dc.description Η Βιβλιοθήκη διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή el
dc.description.abstract Οι φερριτίνες είναι μια υπεροικογένεια πρωτεϊνών αποθήκευσης σιδήρου, εξαπλωμένη σε όλους τους αναερόβιους και αερόβιους ζωντανούς οργανισμούς. Φερριτίνες που απομονώθηκαν από βακτήρια, μπορεί να περιέχουν αίμη ή όχι. Στην πρώτη περίπτωση, λέγονται βακτηριοφερριτίνες. Πρωταρχικός ρόλος των φερριτινών στα κύτταρα είναι να αποθηκεύουν το σίδηρο σε μορφή Fe3+. Ένας δευτερεύοντας ρόλος τους είναι η αποτοξίνωση από το σίδηρο ή να προστατεύουν το κύτταρο από το Ο2 και τις ελεύθερες ενεργές ρίζες του. Φερριτίνες και βακτηριοφερριτίνες έχουν παρόμοια δομή. Ένα 24-μερές σύμπλοκο σχηματίζει ένα σφαιρικό περίπου κέλυφος. Σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η μελέτη της έκφρασης κλωνοποιημένου γονιδίου της βακτηριοφερριτίνης του Azotobacter vinelandii, στελέχη AvOP-2916 και AvOP-5614. Τα γονίδια υποκλωνοποιήθηκαν στον φορέα έκφρασης pET28a(+) και αφού ολοκληρώθηκε η αλληλούχισή τους χαρακτηρίστηκαν ως cDNA κλώνοι της φερριτίνης. Εν συνεχεία εκφράστηκαν ετερόλογα σε κύτταρα Εscherichia coli BL21 (DE3) και εξετάστηκε το επίπεδο έκφρασης στο διαλυτό και αδιάλυτο κλάσμα της ανασυνδυασμένης βακτηριοφερριτίνης σε πηκτή SDS - πολυακρυλαμίδης. el
dc.description.abstract Ferritins constitute a broad superfamily of iron storage proteins, widespread in all domains of life, in aerobic or anaerobic organisms. Ferritins isolated from bacteria may contain a haem or be haem-free. In the first case they are called bacterioferritins. The primary function of ferritins inside cells is to store iron in the ferric form. A secondary function may be detoxification of iron or protection against O2 and its radical products. Ferritins and bacteroferritins have essentially the same architecture, assembling in a 24mer cluster to form a hollow, roughly spherical construction. The aim of this study was to overexpress and characterize a gene encoding for bacterioferritin in nitrogen-fixing bacterium Azotobacter vinelandii strains: AvOP-2916 and AvOP-5614. These genes were subcloned into the expression vector pET28a (+) and after completion of their sequencing, they characterized as cDNA clones of ferritin. Subsequently, they expressed heterologous in Escherichia coli cells BL21 (DE3) and the expression level was examined in the soluble and insoluble fraction of the recombinant bacterioferritin in SDS-polyacrylamide gel. el
dc.language.iso el el
dc.subject Bακτηριοφερριτίνες el
dc.subject Γονίδιο Azotobacter vinelandii el
dc.title Βιοχημική και μοριακή ανάλυση της βακτηριοφερριτίνης του Azotobacter vinelandii el
dc.type Μεταπτυχιακή εργασία el
heal.type masterThesis
heal.generalDescription Η Βιβλιοθήκη διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή el
heal.language el
heal.access free
heal.recordProvider ΓΠΑ Τμήμα Βιοτεχνολογίας el
heal.publicationDate 2014
heal.abstract Οι φερριτίνες είναι μια υπεροικογένεια πρωτεϊνών αποθήκευσης σιδήρου, εξαπλωμένη σε όλους τους αναερόβιους και αερόβιους ζωντανούς οργανισμούς. Φερριτίνες που απομονώθηκαν από βακτήρια, μπορεί να περιέχουν αίμη ή όχι. Στην πρώτη περίπτωση, λέγονται βακτηριοφερριτίνες. Πρωταρχικός ρόλος των φερριτινών στα κύτταρα είναι να αποθηκεύουν το σίδηρο σε μορφή Fe3+. Ένας δευτερεύοντας ρόλος τους είναι η αποτοξίνωση από το σίδηρο ή να προστατεύουν το κύτταρο από το Ο2 και τις ελεύθερες ενεργές ρίζες του. Φερριτίνες και βακτηριοφερριτίνες έχουν παρόμοια δομή. Ένα 24-μερές σύμπλοκο σχηματίζει ένα σφαιρικό περίπου κέλυφος. Σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η μελέτη της έκφρασης κλωνοποιημένου γονιδίου της βακτηριοφερριτίνης του Azotobacter vinelandii, στελέχη AvOP-2916 και AvOP-5614. Τα γονίδια υποκλωνοποιήθηκαν στον φορέα έκφρασης pET28a(+) και αφού ολοκληρώθηκε η αλληλούχισή τους χαρακτηρίστηκαν ως cDNA κλώνοι της φερριτίνης. Εν συνεχεία εκφράστηκαν ετερόλογα σε κύτταρα Εscherichia coli BL21 (DE3) και εξετάστηκε το επίπεδο έκφρασης στο διαλυτό και αδιάλυτο κλάσμα της ανασυνδυασμένης βακτηριοφερριτίνης σε πηκτή SDS - πολυακρυλαμίδης. el
heal.abstract Ferritins constitute a broad superfamily of iron storage proteins, widespread in all domains of life, in aerobic or anaerobic organisms. Ferritins isolated from bacteria may contain a haem or be haem-free. In the first case they are called bacterioferritins. The primary function of ferritins inside cells is to store iron in the ferric form. A secondary function may be detoxification of iron or protection against O2 and its radical products. Ferritins and bacteroferritins have essentially the same architecture, assembling in a 24mer cluster to form a hollow, roughly spherical construction. The aim of this study was to overexpress and characterize a gene encoding for bacterioferritin in nitrogen-fixing bacterium Azotobacter vinelandii strains: AvOP-2916 and AvOP-5614. These genes were subcloned into the expression vector pET28a (+) and after completion of their sequencing, they characterized as cDNA clones of ferritin. Subsequently, they expressed heterologous in Escherichia coli cells BL21 (DE3) and the expression level was examined in the soluble and insoluble fraction of the recombinant bacterioferritin in SDS-polyacrylamide gel. en
heal.advisorName Κατινάκης, Παναγιώτης el
heal.academicPublisher ΓΠΑ Τμήμα Βιοτεχνολογίας el
heal.academicPublisherID aua
heal.fullTextAvailability true
dc.contributor.department ΓΠΑ Τμήμα Βιοτεχνολογίας el
dc.description.degree Βιοτεχνολογία και εφαρμογές στη γεωπονία el


Αρχεία σε αυτό το τεκμήριο

Αυτό το τεκμήριο εμφανίζεται στην ακόλουθη συλλογή(ές)

Εμφάνιση απλής εγγραφής

Αναζήτηση DSpace


Σύνθετη Αναζήτηση

Αναζήτηση

Ο Λογαριασμός μου

Στατιστικές