Σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η μελέτη της σύστασης φύλλων ελιάς σε
διαλυτά φαινολικά συστατικά αλλά και σε φαινολικά του κυτταρικού τοιχώματος,
υπό τροφοπενία βορίου. Τα φαινολικά του κυτταρικού τοιχώματος μελετήθηκαν
μετά από αλκαλική υδρόλυση η οποία διασπά τους πάσης φύσεως εστερικούς
δεσμούς μεταξύ φαινολικών συστατικών και καταλοίπων του κυτταρικού
τοιχώματος καθώς και μετά από επώαση με κατάλληλο βορονικό οξύ το οποίο
προκαλεί επιλεκτική υδρόλυση διεστερικών δεσμών μεταξύ του βορικού οξέος και
των φαινολικών συστατικών τα οποία ενδεχομένως προσδένονται με τον τρόπο
αυτό σε κατάλοιπα πολυμερών του κυτταρικού τοιχώματος.
Κατά την πειραματική περίοδο πραγματοποιήθηκε υδροπονική καλλιέργεια
φυτών ελιάς σε θρεπτικό μέσο με τρεις διαφορετικές συγκεντρώσεις Βορίου (0 μΜ,
0,5 μΜ και 23μΜ H
3
BO
). Διακρίθηκαν τρεις ηλικιακές κατηγορίες φύλλων,
εκπτυσσόμενα, πλήρως εκπτυγμένα και ώριμα. Αρχικά, απομονώθηκαν τα
φαινολικά συστατικά του διαλυτού κλάσματος. Στην συνέχεια απομονώθηκαν
κυτταρικά τοιχώματα και έγινε παραλαβή και ανάλυση εστεροποιημένων
φαινολικών συστατικών μετά από αλκαλική υδρόλυση με NaOH καθώς και
παραλαβή και ανάλυση φαινολικών συστατικών τα οποία είναι θεωρητικά
προσδεδεμένα μέσω βορικών διεστέρων
μετά από επώαση με 3νιτροφαινυλοβορονικό
οξύ (3-ΝΒΑ). Οι ελλειμματικές σε βόριο μεταχειρίσεις
προκάλεσαν τροφοπενία βορίου ιδιαίτερα στα νεαρά φύλλα. Επίσης, παρατηρήθηκε
δραματική αύξηση της συγκέντρωσης του ακτεοσίδη (στο διαλυτό κλάσμα) σε όλα
σχεδόν τα τροφοπενιακά φύλλα, ιδιαιτέρως στη μεταχείριση Β0. Τα αποτελέσματα
των δύο κλασμάτων φαινολικών συστατικών των απομονωμένων κυτταρικών
τοιχωμάτων έδειξαν ότι δύο συστατικά, τα Α315 και Α331, με χαρακτηριστικά
φάσματα απορρόφησης φαινολικών συστατικών, προσδένονται με διαφορετικό
τύπο εστερικού δεσμού συγκριτικά με τα υπόλοιπα φαινολικά συστατικά του
κυτταρικού τοιχώματος και πιθανότατα μέσω βορικών διεστερικών δεσμών. Από
την άλλη πλευρά, τα φαινολικά συστατικά που προσδένονται με συνήθεις
εστερικούς δεσμούς στο κυτταρικό τοίχωμα παρουσίασαν αύξηση λόγω της
τροφοπενίας βορίου γεγονός το οποίο διαπιστώνεται για πρώτη φορά. Η
διαφορετική επίδραση της τροφοπενίας βορίου στα φαινολικά συστατικά των δύο
κλασμάτων υποδηλώνει διαφορετική φύση των δεσμών μέσω των οποίων τα
συστατικά αυτά προσδένονται στο τοίχωμα.
The purpose of this work was the study of the composition of olive leaves in
soluble phenolic compounds and phenolic compounds of the cell wall, under boron
deficiency. The phenolics of the cell wall were studied after alkaline hydrolysis
which breaks down ester linkages between phenolic compounds and residues of
cell wall polysaccharides and after incubation with the appropriate boronic acid
which causes selective hydrolysis of tentative complexes between phenolic
compounds and polysaccharide residues through borate diester bonds.
During the experimental period, olive seedlings were grown using semihydroponic
cultivation
in
sand supplied with media with three different
concentrations of boron (0 mM, 0,5 mM and 23 mM H
3
BO
). Three leaf ages were
sampled, namely developing, fully expanded and mature. Phenolic compounds of
the soluble and the insoluble (cell wall bound) fraction were isolated and
analysed. For the latter, phenolic compounds of isolated cell walls, were either
released via alkaline hydrolysis with NaOH or via incubation with 3nitrophenylboronic
acid (3-NBA). According to the results, low boron supply
(treatments B0 and B05) caused boron deficiency which was especially apparent
in young leaves. A dramatic increase in the concentration of acteoside (a
phenylethanoid glucoside of the soluble fraction) was apparent in almost all lowboron
treatments
and
leaf
ages
but
especially
in
B0
plants.
Study of the
composition of phenolic compounds of the two different fractions isolated from
cell walls showed that two metabolites, A315 and A331, with characteristic
absorption spectra of substituted aromatic ring, are bound through a different
type of ester bond compared with other phenolic components found in the NaOH
fraction, probably through borate-diester links, since they were only present in
the 3-NBA fraction. On the other hand, phenolic components which were bound
via normal ester bonds in the cell wall increased due to boron deficiency, a result
that is reported for the first time. The different effect of boron deficiency on
phenolic constituents of the two fractions suggests a different type of ester link
through which these components attached to the cell wall.
