Μελέτη των πρωτεϊνών στους ανθοφόρους οφθαλμούς των ποικιλιών "Manzanillo" & "Χαλκιδικής" της ελιάς (Olea Europaea L.) την χειμερινή περίοδο

Abstract

Τελευταία όλο και περισσότερα ερευνητικά δεδομένα προστίθενται στο φαινόμενο της "αλλαγής φάσης" από τη βλαστητική στην αναπαραγωγική φάση, τα οποία έχουν αποκαλύψει την εμπλοκή ειδικών γόνων στην αλλαγή φάσης του κορυφαίου μεριστώματος του βλαστού (ΤΡ gene στο καλαμπόκι, AGL20 και LFY σε Arabidopsis και Antirrhinum).

Στη παρούσα εργασία επιλέξαμε την προσέγγιση μέσω της αναμενόμενης διαφορετικής έκφρασης του ελέγχου της εξέλιξης πλάγιων οφθαλμών από το χειμώνα μέχρι την άνοιξη

Η προσέγγιση πραγματοποιήθηκε σε πρωτεϊνικό επίπεδο μέσω SDS-PAGE και 2-DE. Χρησιμοποιήθηκαν πλάγιοι οφθαλμοί, από δύο ποικιλίες ελιάς την Manzanillo και την Χαλκιδικής. Έγινε ανάλυση με SDS-PAGE και 2-DE πλάγιων οφθαλμών την περίοδο Φεβρουαρίου-Μαρτίου και ταυτόχρονα σύγκρισή τους στις δύο ποικιλίες.

Την περίοδο Φεβρουαρίου-Μαρτίου, η συγκέντρωση των ολικών υδατοδιαλυτών πρωτεϊνών ακολουθεί κυματοειδή καμπύλη με υψηλότερες τιμές την 29/2 , 20/3 και χαμηλότερη την 15/2. Το γενικό πρωτεϊνικό προφίλ ήταν παρόμοιο μεταξύ των ποικιλιών. Και στις δύο ποικιλίες, απομονώθηκαν οι περισσότερες πρωτεΐνες, καλύπτοντας σχεδόν όλο το εύρος από 19 έως 164 kDa. Η περιοχή με τις περισσότερες αριθμητικά όσο και ισχυρότερα εκφραζόμενες πρωτεΐνες, οι οποίες εμφανίστηκαν σχεδόν σε όλες τις ημερομηνίες και κοινές και στις δύο ποικιλίες ήταν μεταξύ 40 και 56 kDa. Οι μικρού και μεγάλου μοριακού βάρους πρωτεΐνες, εμφανίζονται και στις δύο ποικιλίες, αν και στην Manzanillo σε λιγότερες ημερομηνίες.

Με την προσομοίωση των 2-DE χαρτών προσδιορίστηκαν στις 29/2, 35 κηλίδες στη Manzanillo και 39 στη Χαλκιδικής ενώ στις 20/3, 37 κηλίδες στη Manzanillo και 30 στη Χαλκιδικής. Μερικές κηλίδες ήταν πιο έντονες. Διαπιστώθηκαν κηλίδες σε όλο το εύρος του pH (4-7), μερικές με το ίδιο ΜΒ και διαφορετικό p Ι. Και στις δύο ποικιλίες οι διαφορετικές κηλίδες ήταν περισσότερες από τις κοινές, μεταξύ των δύο δειγματοληψιών 29/2 και 20/3.

Τα δεδομένα μας για τις ποιοτικές και ποσοτικές μεταβολές των πρωτεϊνών εκφράζουν τον διαφοροποιημένο έλεγχο στην εξέλιξη των πλάγιων οφθαλμών της ελιάς στις διαφορετικές ημερομηνίες της περιόδου Φεβρουαρίου-Μαρτίου.

Last more and more research data are added to the phenomenon of "phase change" from the vegetative to reproductive phase, which have revealed the involvement of specific genes in the change phase of the top of the shoot meristem (TP gene in corn, AGL20 and LFY in Arabidopsis and Antirrhinum ). In this work we chose the approach through the expected differential expression of the control of lateral bud development from winter to spring. The approach was at the protein level by SDS-PAGE and 2-DE. We used lateral buds from two olive varieties, Manzanillo and Chalkidiki. Lateral buds were analyzed by SDS-PAGE and 2-DE during the period of February-March, while comparing them to the two varieties. During February-March, the concentration of the total soluble water proteins follows a wave curve with higher values on 29/2, 20/3 and the lowest on 15/2. The overall protein profile was similar between the varieties. For both varieties most proteins were isolated, covering almost the entire range from 19 to 164 kDa. The region with the biggest number and the strongest expressed proteins, which appeared in almost all the dates and were common to both varieties was between 40 and 56 kDa. The low and high molecular weight proteins appear in both varieties, although in Manzanillo on fewer dates. By simulating the 2-DE maps, 35 spots in Manzanillo and 39 in Chalkidiki were identified on 29/2, while 37 spots in Manzanillo and 30 in Halkidiki on 20/3. Some spots were more severe. There were spots in the whole range of pH (4-7), some with the same MB and different p I. To both varieties the different spots were more than the common ones between the two samples of 29/2 and 20/3. Our data on the qualitative and quantitative changes in proteins express the diverse control on the development of lateral buds of the olive trees on different dates for the period February-March.